高质量抗体研发中不可或缺的一体化荧光显微镜

抗体——生物学实验必不可少的核心试剂

图 1-1 抗体结构
抗体(antibody,Ab)是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。它(免疫球蛋白不仅仅只是抗体)是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。

随着生命科学领域的发展,我们发现了越来越多的未知蛋白,在这些未知蛋白的研究中,抗体试剂其结合特异性和易于标记酶、荧光色素的优异特性逐渐凸显,被越来越广泛地使用。在包括但不限于 Western Blot、ELISA、IHC、IF 和 FC 等在内的生物学实验中,选择的抗体是否适合、是否可以正常工作、是否特异性好等因素直接决定了是否能得到理想的实验数据,因此是生物领域实验中必不可少的“核心试剂”。

图 1-2 单克隆抗体(mAb)和多克隆抗体(pAb)
图 1-3 一抗和二抗

初步了解生物学实验的你可能听说过“一抗”和“二抗”这两个专业术语,那么抗体是有两个吗?实际上,我们常说的抗体大多指的是第一抗体,即一抗,它是一类可以和抗原特异性结合的蛋白,包括单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)和多克隆抗体(polyclonal antibody,pAb)。mAb主要识别抗原上单个的表位,而pAb可以同时与目标抗原上不同的位点发生特异性结合。

而第二抗体,即二抗,是将一抗视为抗原,与其进行特异性结合,成为抗体的抗体,其主要的作用是“信号扩增”,即倍数级放大一抗的信号,使其与抗原的结合更易被如荧光显微镜之类的设备所检测到,使结果更加明显。

博奥森——业界知名的免疫学试剂提供者

博奥森生物,自2001年诞生以来,便坚守在生命科学前沿,为全球科研人员提供卓越品质的免疫学试剂产品与服务。其拥有资深的科学家团队、先进的抗体发现、验证与生产平台,并持续坚持“自主研发、原始创新”的理念,确保每一款产品符合国际标准,持续提供“4R”品质科研工具【Repeatable(可重复)、Replicable(可复制)、Reproducible(可再现)和 Reliable(可靠的)】。

依托位于波士顿的Bioss全球品牌中心,博奥森的产品已遍布全球众多高校、科研机构及生物制药公司,成为科研人员的得力助手。在坚守“中国制造,知名品牌”承诺的同时,严格执行ISO 9001,ISO 13485等国际质量管理体系,以行业高标准为全球生命科学研究提供全方位的服务。

图 2-1 博奥森“4R”品质科研工具
图 2-2 博奥森应用领域
博奥森具有完善的研发系统,配备了国际上先进的多种高端精密仪器设备,拥有从靶点生物信息学分析、表位设计,到研发、生产,再到抗体制备、验证、标记的一条龙研发平台。借此,博奥森能够开发出高特异性、高灵敏度的抗原抗体产品,很大程度上能够满足客户对高品质抗原产品的制备需求。此外,博奥森还具有工业化生产技术平台,可以提供毫克至克级多肽合成及纯化服务,抗体工业化生产等等。不管是动物蛋白的抗体、植物蛋白的抗体,小分子化合物抗体,还是病毒、细菌抗体等,博奥森都能成功完成制备,也正因如此,得到了广泛的好评。

BZ 系列——博奥森优质服务提供的背后助力

一体化荧光显微成像系统
BZ-X 系列

在博奥森北京亦庄研发总部,流式组经理王昊然老师向我们热情地分享了基恩士一体化荧光显微镜BZ-X800LE 系列给他在科研工作中带来的帮助。

王老师表示,基恩士一体化荧光显微镜高度自动化的操作系统,让观察拍摄简单便捷,而且减少了人为操作导致的误差。直观的操作界面,降低了培训的成本,可拓展模块系统,一台设备就能满足各类试验需求,比如在高质量抗体开发过程中用的比较多的大图拼接、Z轴扫描等,还可以通过光学切片模块实现高清观察。

图 3-1 博奥森流式组经理王昊然老师在实验室接受采访
图 3-2 BZ 制冷CCD高灵敏成像(左)和多色荧光标记(右)

在进行抗体开发的过程中,经常需要对荧光标记的抗体进行评价,对于比较标记量较低荧光较弱的样品,曝光时间较长而且容易发生淬灭现象,基恩士荧光显微镜的冷却CCD能一定程度上提高信噪比,而且防淬灭功能也能很大限度的增加了样品的寿命,减少成本消耗。而且在对比实验中,基于高度自动化的系统,可以通过图片自动记录的拍摄条件,全面恢复当时的拍摄条件,保证拍摄的条件唯一性、可再现性和稳定性。而且该设备外形小巧且无需暗室,同样节省了放置空间以及准备专用暗室的费用。

图 3-3 BZ 多色荧光标记全脑大图拼接

BZ 系列——帮助博奥森大幅度提升科研效率

在细胞免疫荧光这一重点领域,博奥森致力于以超高的效率和优异的质量来进行研发,因此引进了基恩士BZ荧光显微镜这个先进平台。在导入这个平台之前,公司的正置荧光显微镜只能观察细胞爬片,样本准备的时候得先铺细胞爬片,观察的时候还得制成切片,步骤特别繁琐。但基恩士 BZ 荧光显微镜可以快速实现以下内容 :

一体化荧光显微成像系统
BZ-X 系列

(1)直接观察孔板、玻片、培养皿、培养瓶等大多数实验用具,受材质局限程度小,玻璃底的共聚焦皿、塑料底的多孔板都可以实现高清晰的观察,对实验的设计提供了更宽泛地选择 ;

(2)全电动化的控制使得实验人员仅需1键即可实现自动对焦、物镜倍率切换和荧光通道切换,通过导航小地图就可以快速地找到自己想拍摄的细胞位置,即使是对新进实验室的初学者来说也能非常快速地掌握此荧光显微镜的用法,大大减少了企业对人员培育投入的时间和成本 ;

(3)操作简单的光学切片成像方式,通过使用了电器投影元件的结构化照明(Structured illumination)高速扫描标本。由于使用LED光源而非激光,即减轻了荧光淬灭,又能在大范围的波长领域内获取到没有荧光模糊的高分辨率图像。BZ 系列在成像质量基本媲美的同时,成像速度更快、光毒性更低、操作更简便 ;

图 4-1 结构化照明(Structured illumination)成像

对于较厚的标本,也可以准确检测出焦平面的信息,获得清晰的图像。真实呈现动物细胞、植物细胞、培养组织等各种标本。

图 4-2 肾脏整装铺片(左)和小鼠脑神经(右)

此外,基恩士还提供免费的售前试用和售后技术培训服务。在正式购入前,基恩士工程师会将显微镜免费借用,帮助实验室提高研发进度。当购入后新实验员需要培训或显微镜使用中出现问题时,基恩士专业的技术工程师也会快速响应进行帮助,帮助企业快速恢复高效研发状态,提高生产效率。

图 4-3 基恩士工程师指导拍摄