将细胞吞噬可视化(小胶质细胞吞噬颗粒的过程)

可进行稳定的延时拍摄

出处:Courtesy of Postdoctoral Research Scholar Tomomitsu Iida, Leonard Davis School of Gerontology, University of Southern California
(When published:Department of Pharmacology, Tohoku University Graduate School of Medicine)

要成功地进行一次延时拍摄,会涉及到许多技术难题,例如在拍摄过程中因细胞活动导致对焦错位,长时间照射激发光导致细胞活性降低等。
而All-in-One荧光显微成像系统则能够借助对焦跟踪功能、脉冲激发和高灵敏度相机,让活细胞成像变得非常简单。

在小胶质细胞吞噬颗粒的过程中,光靠相位差图像,无法判断颗粒究竟是已经被吞噬到了细胞内,还是仍旧附着在细胞表面。
这次我们对颗粒进行了荧光标记,让已经被细胞吞噬的颗粒发出红色荧光,借此实现细胞吞噬的可视化。
* 具体来说,就是在颗粒上修饰pH指示剂(会在酸性条件下发出红色荧光的物质),一旦颗粒被吞噬到细胞内并与酸性的溶酶体融合,就会变为红色。
利用荧光实现可视化后,还能对细胞计数及吞噬量进行定量评价。